Pengendalian Variabilitas Akurasi Pipetting: Analisis Pengaruh Volume Sampel terhadap Keandalan (Reliabilitas) Hasil Widal Test

Keandalan pemeriksaan Widal tidak hanya dipengaruhi oleh kualitas reagen dan interpretasi aglutinasi, tetapi juga oleh ketepatan pemipetan volume serum. Penelitian ini bertujuan menganalisis pengaruh variasi volume sampel terhadap reliabilitas hasil Widal test serta menggambarkan hubungan antara penyimpangan volume dan konsistensi pembacaan titer. Penelitian menggunakan desain eksperimental laboratorik dengan 30 sampel serum berkode yang mewakili titer acuan 1:80, 1:160, dan 1:320. Setiap sampel diperiksa pada volume serum 10, 15, 20, 25, dan 30 µL dengan volume antigen 50 µL dan tiga pengulangan. Keakuratan pemipetan diverifikasi secara gravimetrik, sedangkan hasil Widal dinilai berdasarkan skor aglutinasi dan titer. Reliabilitas dinilai melalui kesesuaian hasil terhadap volume standar 20 µL, persentase kesepakatan, dan weighted kappa.
Pada data simulasi, volume 20 µL menunjukkan kesesuaian paling tinggi dengan hasil acuan, dengan weighted kappa 1,00. Volume 15 µL dan 25 µL menunjukkan kesesuaian berturut-turut 76,7% dan 83,3%, sedangkan 10 µL dan 30 µL menunjukkan penurunan kesesuaian menjadi 20,0% dan 30,0%. Secara umum, perubahan volume serum menggeser rasio serum terhadap antigen dan menyebabkan perubahan pembacaan titer. Temuan ini mendukung pentingnya pemipetan yang terstandar, pemilihan volume sesuai petunjuk kit, serta pemantauan akurasi dan presisi pipet sebagai bagian dari pengendalian mutu pemeriksaan Widal.
Kata kunci: Widal test; pipetting; akurasi; presisi; reliabilitas; volume sampel; aglutinasi.